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PS Capture™ Exosome Flow Cytometry Kit
PS Capture™外泌体流式试剂盒,货号-规格:297-79701-300 tests
 
产地: Wako
规格: 300 tests
购买数量:
产品详情
说明书下载
参考文献


PS Capture™外泌体流式试剂盒,货号-规格:297-79701-300 tests

PS Capture™ 外泌体流式试剂盒

PS Capture™ Exosome Flow Cytometry Kit

  本产品是通过运用磷酯酰丝氨酸(PS)特异性结合的Tim4蛋白质和磁珠的新型亲和法,可将细胞外囊泡捕获到磁珠上面,通过流式细胞仪高灵敏度检测表面标记蛋白的试剂盒。无需从细胞培养上清和体液检体中提取细胞外囊泡,即可直接定性分析表面标记蛋白。

  使用前请准备好各表面标记蛋白对应一抗和荧光素标记的二抗或荧光素标记的一抗。


检测方法


1.jpg



试剂盒内容


试剂盒组成(300次用)

容量

外泌体捕捉磁珠

3mL×1支

洗脱缓冲液(10×)

45mL×2支

外泌体结合增强剂(100×)

15mL×1支



K562细胞培养上清所含外泌体表面抗原分析


  用本产品或其他公司产品(抗CD81、CD9、CD63抗体固化磁珠)固定K562细胞培养上清所含外泌体,与荧光标记抗CD63、CD9、CD81抗体结合后,通过流式细胞仪分析外泌体表面抗原。


2.jpg

3.jpg


4.jpg


  上述检测抗体均表明,本产品比其他公司产品检测外泌体表面抗原的灵敏度更高。


◆相关产品

  COLO201细胞培养上清、人血清、人血浆(EDTA血浆、肝素血浆)所含外泌体表面抗原的分析

  利用本产品对COLO201细胞培养上清、人血清、人血浆(EDTA血浆、肝素血浆)的外泌体进行固定,通过PE标记小鼠IgG同型对照或PE标记抗人CD9抗体对外泌体进行检测。


5.jpg


● 样品:COLO201培养上清、人血清、人血浆(EDTA血浆、肝素血浆)各100μL

● 检测抗体:PE标记抗CD9抗体

  全部样品通过PE标记抗人CD9抗体染色,都可确认到荧光强度峰值的变化。从该结果可判断,本产品可以检测出细胞培养上清、血清、血浆中的外泌体。


产品编号

产品名称

包装

297-79701

PS Capture™ Exosome Flow Cytometry Kit

PS Capture™外泌体流式试剂盒

300次用


更多应用说明,请点击:

新型亲和性外泌体纯化法与外泌体高灵敏度检测应用

外泌体与肿瘤细胞转移及恶化的关联

欲了解相关产品请点击文字:

MagCapture™ 外泌体提取试剂盒

PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)

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PS Capture™ 外泌体流式试剂盒PS Capture™ Exosome Flow Cytometry Kit


常见问题

◆试剂盒规格、功能

Q1-1:本试剂盒中含有外泌体检测用的抗体吗?

A1-1:本试剂盒中不含外泌体检测用的荧光标记抗体。荧光素结合抗CD63抗体(产品编号:018-27641)和红色

A1-1:荧光色素结合抗CD63抗体(产品编号:011-27751),或者其他合适的荧光标记抗体需另行购买。


Q1-2:可以使用荧光标记二抗进行检测吗?

A1-2:可以,分离外泌体后,按照以下操作进行一抗反应、二抗反应和游离细胞计数法分析:

A1-1:① 混合未标记的一抗和外泌体捕获磁珠在室温下静置1 h。在20 min、40 min、1 h的时候涡旋振荡约5 s,

A1-1:搅拌磁珠;

A1-1:② 用300 μL WB(+Enhancer)清洗2次;

A1-1:③ 用WB(+Enhancer)100倍稀释PE标记二抗(Jackson Immuno Research Laboratories,产品编号:

A1-1:115-115-164),添加②的磁珠;

A1-1:④ 室温下静置1 h。期间在20 min,40 min,1 h的时候涡旋振荡约5秒,并搅拌磁珠;

A1-1:⑤ 用300 μL WB(+Enhancer)清洗3次;

A1-1:⑥ 在300 μL WB(+Enhancer)中重悬磁珠;

A1-1:⑦ 用流式细胞仪分析。


Q1-3:本试剂盒可以检测人以外的生物种的外泌体吗?

A1-3:可以。有人、小鼠、牛、猴子的使用实例。


Q1-4:MagCapture™ 外泌体提取试剂盒PS(产品编号: 293-77601)适用于流式细胞术吗?

A1-4:MagCapture™ 外泌体提取试剂盒PS是纯化外泌体的试剂盒,不是流式细胞术检测用的试剂盒。PS

A1-1:Capture™ 外泌体流式试剂盒的磁珠和Washing Buffer的成分是根据流式细胞术检测条件而优化的,所以

A1-1:请使用PS Capture™ 外泌体流式试剂盒。


◆试剂盒的操作方法、组成

Q2-1:本试剂盒的操作时间需要多久?

A2-1:样品预处理约1 h,试剂盒所有的步骤总计需要约2 h+20 min。具体包括:①与样品反应1 h;②荧光标记

A1-1:抗体染色1 h;③清洗约20 min。


Q2-2:多个外泌体捕获磁珠可能与一个外泌体结合,造成磁珠聚集。这种情况下,能准确进行测试吗?

A2-2:建议根据前向角和侧向角散射光确定的单线态磁珠部分来调整设门参数,然后检测外泌体捕获磁珠在所选区

A1-1:域内的荧光信号。一般单线态磁珠占总体样本的50%~70%。


Q2-3:如何检测已纯化的外泌体样品?

A2-3:将纯化完成的外泌体稀释成适当的浓度后,按照使用说明书的2. 细胞外囊泡的分离进行实验。稀释纯化外泌

A1-1:体时,请使用超纯净水10倍稀释的试剂盒配套的Washing Buffer(10×)。可检测出纯化外泌体的浓度范

A1-1:为125~1000 ng/mL。检测抗体建议使用抗CD63单克隆抗体(3-13),红色荧光色素(635)结合(产

A1-1:编号: 011-27751)。


Q2-4:用10种不同抗体检测时,所需的样品和磁珠的量是多少?

A2-4:请参考使用说明书的表2各反应数中试剂以及样品的使用量。表2中有说明10次反应量。用367 μL的样品和

A1-1:110 μL Exosome Capture Beads 反应并分离外泌体,用WB(+Enhancer)清洗后,在1,100 μL WB

A1-1:(+Enhancer)中悬浮磁珠。然后,根据3免疫染色分成100 μL一小份的步骤进行后续实验。


◆样品用量

Q3-1:检测使用的样品的最低量是多少?

A3-1:1个样品需要33 μL左右。但是,样品中所含的细胞外囊泡较少时,请将已经过离心处理的细胞培养上清进行

A1-1:超滤浓缩后再上样。(推荐超滤管:Sartorius Vivaspin20,截留分子量100 K,产品编号:VS2041)


◆相关产品

Q4-1:有销售磁力架吗?

A4-1:有的。Wako也供应磁珠捕获用磁力架(产品编号:290-35591)。


◆疑难

Q5-1:磁力架上的磁珠不集磁。

A5-1:本试剂盒的外泌体捕获磁珠针对流式细胞仪检测进行了优化,磁珠浓度降低。因此,有时用目测难以确认磁

A1-1:珠集磁。进行清洗操作前,将样品管在磁力架上静置至少1 min,小心缓慢地进行移液操作且避免枪头吸到

A1-1:磁珠。




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