甲基化概述
甲基化是蛋白质和核酸的一种重要的修饰，调节基因的表达和关闭，与癌症、衰老、老年痴呆等许多疾病密切相关，是表观遗传学的重要研究内容之一。 最常见的甲基化修饰有DNA甲基化和组蛋白甲基化。DNA甲基化能关闭某些基因的活性，去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变，从而控制基因表达。
甲基化检测方法：
基本原理在于:样本经亚硫酸盐处理后,甲基化的胞密啶（C）保持不变，但非甲基化的胞嘧啶被转化成脲嘧啶,因此在利用该处理产物作为模板的PCR产物中,甲基化的胞嘧啶还是胞密啶，但非甲基化胞嘧啶变成了脲嘧啶（U）或者胸腺嘧啶（T），此时检测到的胞嘧啶（C）即是样品中本身的甲基化位点。
Zymo Research – DNA甲基化分析的完整解决方案
Zymo于1994年成立于美国加州Orange County，主要研发和生产表观遗传学系列产品和常用分子生物学试剂盒，其DNA甲基化，羟甲基化，核酸提取等产品已得到世界各顶级实验室的认可，产品具有“快速、简便、超纯”的特点。
Zymo甲基化产品线已被上千次引用在各大主流学术刊物上，包括NATURE、SCIENCE 、PNAS、Stem Cells、 Nucleic Acids Res等；迄今，EZ DNA Methylation™系列产品作为DNA重亚硫酸盐处理（DNA甲基化分析前处理）的的金标准，已成为最畅销和引用次数最多的产品。
——全球最受好评的重亚硫酸盐转化试剂盒
产品1 - EZ DNA Methylation™ Kits (转化率＞99%)
该试剂盒已被Illumina, Sequenom, Nimblegen，Agilent，Roche等公司整合入其标准化工作流程中
品名 | 规格 | 货号 |
EZ DNA Methylation™ Kit （柱子） | Column, 50 Rxns, 200 Rxns | D5001 |
D5002 |
EZ-96 DNA Methylation™ Kit (96孔板高通量） | Shallow-Well, 2 x 96 Rxns | D5003 |
Deep-Well, 2 x 96 Rxns | D5004 |
EZ-96 DNA Methylation MagPrep (高通量磁珠法) | 4x96 rxns, 8x96 rxns | D5040 |
D5041 |
产品2 - EZ DNA Methylation™-Gold Kits (转化率＞99%)
该试剂盒是目前最受欢迎的重亚硫酸盐转化试剂盒，小于3小时转化时间
品名 | 规格 | 货号 |
EZ DNA Methylation-Gold™ Kit （柱子） | 50 Rxns, 200 Rxns | D5005 |
D5006 |
EZ-96 DNA Methylation-Gold™ Kit (96孔板高通量） | Shallow-Well, 2 x 96 Rxns | D5007 |
Deep-Well, 2 x 96 Rxns | D5008 |
EZ-96 DNA Methylation-Gold MagPrep (高通量磁珠法) | 4x96 rxns, 8x96 rxns. | D5042 |
D5043 |
产品3 - EZ DNA Methylation™-Direct Kits (转化率＞99.5%)
该试剂盒可直接以细胞（≥10个细胞），血液和组织（FFPE）作为起始模板，并适合低样本起始量（10个细胞 或 50pgDNA）
品名 | 规格 | 货号 |
EZ DNA Methlyation-Direct™ Kit （柱子） | 50 Rxns, 200 Rxns | D5020 |
D5021 |
EZ-96 DNA Methlyation-Direct™ Kit (96孔板高通量） | Shallow-Well, 2 x 96 Rxns | D5022 |
Deep-Well, 2 x 96 Rxns | D5023 |
EZ-96 DNA Methylation-Direct MagPrep (高通量磁珠法) | 4x96 rxns, 8x96 rxns. | D5044 |
D5045 |
产品4 - EZ DNA Methylation™-Lightning Kits (转化率＞99.5%)
该试剂盒可达最快的1小时处理时间，彻底完成DNA的转化
品名 | 规格 | 货号 |
EZ DNA Methlyation-Lightning Kit（柱子） | 50 Rxns, 200 Rxns | D5030 |
D5031 |
EZ-96 DNA Methylation-Lightning Kit(96孔板高通量） | Shallow-Well, 2 x 96 Rxns | D5032 |
Deep-Well, 2 x 96 Rxns | D5033 |
EZ-96 DNA Methylation-Lightning MagPrep(高通量磁珠法) | 4x96 rxns, 8x96 rxns. | D5046 |
D5047 |
图注：经重亚硫酸盐处理后的DNA测序表明：位点5的甲基胞嘧啶保持不变，而未甲基化的胞嘧啶（如：位点7,9,11,14和15）在重亚硫酸盐处理后被完全转化为尿嘧啶，并在PCR扩增后以胸腺嘧啶被检测到。
产品5 - EZ RNA Methylation Kit (转化率＞99%)
品名 | 规格 | 货号 |
EZ RNA Methylation Kit | 50 prep, 200 prep | R5001 R5002 |
•该产品为首款商品化的RNA重亚硫酸盐转化试剂盒
•配套Zymo Direct-zol™ RNA MiniPrep (Cat.No. R2050， R2052) 使用，效果杠杠的！
•转化得到的RNA可用于RT-PCR, sequencing, library preparation and Next-Gen sequencing等
——优质DNA标准品 - 精确定量DNA甲基化程度
Universal Methylated DNA Standards
•使用甲基化和未甲基化DNA对照，精确测定重亚硫酸盐转化效率
•与Zymo所有重亚硫酸盐转化产品兼容
品名 | 规格 | 货号 |
Human Methylated & Non-Methylated DNA Set | 1 Set | D5014 |
Human WGA Methylated & Non-Methylated DNA Set | 1 Set | D5013 |
Universal Methylated Human DNA Standard | 20rxns | D5011 |
Universal Methylated Mouse DNA Standard | 20rxns | D5012 |
图注：使用M.Sssl 甲基化酶测定的完全甲基化。
来源于HCT116 DKO细胞的非甲基化和甲基化的DNA经Mspl 和 Hpall 限制性内切酶消化处理。Mspl可消化非甲基化和甲基化的DNA，而Hpall只能消化非甲基化DNA，无法消化CpG的甲基化。
——5-mC & 5-hmC ELISA Kits -灵敏的5-mC和5-hmC定量
•适用于基因组DNA中5-mC和5-hmC的高通量全局检测
•整个工作流程最快可在3小时内完成
品名 | 规格 | 货号 |
5-mC DNA ELISA Kit | 1 x 96 Preps | D5325 |
2 x 96 Preps | D5326 |
Quest 5-hmC™ DNA ELISA Kit | 1 x 96 Preps | D5425 |
2 x 96 Preps | D5426 |
图注：5-mC DNA ELISA Kit可定量检测来自于众多样本来源DNA中 5-mC程度（%），其结果与LC-MS检测样本结果密切关联。
——其他甲基化研究相关试剂
※ 更多甲基化系列产品请登录www.zymoresearch.com或咨询诺扬生物0571-86893171
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常见问题解答：
Q：在用Zymo的重亚硫酸盐试剂盒处理前，起始DNA样本应该储存在TE，水，还是其他缓冲液中？
A：水和TE缓冲液均可用来储存DNA，并且不会对转化过程造成干扰。
Q: 为什么使用EZ DNA Methylation-Direct Kit，我的DNA没有得到完全的转化？
A： 1） 如果是固体样本，很可能是处理的样本量过大，而导致不完全DNA转化；
2）如果是FFPE组织样本，有可能是DNA已大规模受损以及/或者交联，导致不完全转化；
3）如果在Proteinase K消化后，没有通过离心去除碎片，则可能会干扰重亚硫酸盐转化过程，导致DNA的不完全转化；
Q: 为什么EZ-96 DNA Methylatioin 甲基化（96孔板）产品线有两种不同的目录号？
A: 这两种不同的目录号是用来区分试剂盒内不同类型的96孔板。深孔板和浅孔板均适用于大多数离心机和微板架。如下阐释了这两类96孔板的区别：
| Silicon-A | Zymo-Spin I-96 |
款式 | 浅孔 | 深孔 |
尺寸（H x W x L） | 19 mm x 83 mm x 125 mm | 35 mm x 83 mm x 125 mm |
结合/收集板组合高度 | 43 mm | 60 mm |
结合力/最小洗脱体积 | 5µg/30µl per well | 5µg/15µl per well |
货号 | D5003, D5007, D5022, D5032 | D5004,D5008, D5023, D5033 |
Q： Zymo 重亚硫酸盐处理试剂盒与illumina技术平台兼容吗？
A: 是的，Zymo的EZ DNA Methylation Kit技术被illumina推荐使用在其GoldenGate和Infinium Assays平台上；
Q： 用Zymo的EZ DNA Methylation Kit转化得到的DNA可用作哪些下游分析应用？
A: 用Zymo的任何一款EZ DNA Methylation kit转化得到的DNA，可完美适用于后续的各类权威测序分析法，Ms-SNuPE, COBRA, Bisulfite-PCR, MSP, Bisulfite-sequencing, mass spectroscopy (如： Sequenom的EpiTYPER), 以及其他分析方法。
