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核酸提取多种选择，满足不同需求！ 二维码
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发表时间：2018-03-21 19:58作者：诺扬生物 背景介绍： 核酸分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），其中RNA又可以根据功能的不同分为核糖体RNA(rRNA)，信使RNA（mRNA）和转移RNA（tRNA）。 DNA主要集中在细胞核内，线粒体和叶绿体中，而RNA主要分布在细胞质当中。 核酸为两性电解质，相当于多元酸，可以使用中性或偏碱性的缓冲液使核酸解离成阴离子，置于电场中向阳极运动，这就是电泳的原理。
核酸提取类型 1、总RNA提取 总RNA中，75-85%为rRNA(主要是28S-26S/23S和18S/16S rRNA)，其余的由分子量大小和核苷酸序列各不相同的mRNA和小分子RNA如tRNA、5S rRNA、5.8S rRNA、miRNA、siRNA、小核RNA（small nuclear RNA，snRNA）及核仁小分子RNA（small nuceolar RNA，snoRNA）等组成。 2、miRNA提取 MicroRNAs (miRNAs)是小型的、高度保守的RNA分子，如小干扰RNAs (siRNAs)，通过与他们的碱基配对调节其同源mRNA的分子表达，以预防通过各种机制的表达。他们已成为进行发育、细胞增殖、分化和细胞周期的重点监管机构。 3、基因组DNA提取 进行基因结构和功能研究以及基因诊断，通常要求得到的片段长度不小于100～200kb。在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基础。 4、质粒抽提 质粒抽提方法即去除RNA，将质粒与细菌基因组 DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。 产品分类：
产品列表： 一、RNA提取系列 —RNA提取试剂盒（组织、细胞） （1）本试剂盒将高效的异硫氰酸胍裂解技术与硅基质膜纯化技术相结合，可从动物细胞及组织中高效提取总RNA。起始样本一般最多30 mg组织或1x107细胞。本试剂盒还可回收未完全纯化的RNA、体外转录和酶促反应后得到的RNA。用本试剂盒可提取纯化分子量大于200碱基的高品质RNA，几乎无DNA残留。如果要进行对微量DNA非常敏感的RNA实验，残留的DNA可利用无RNase的DNase在柱上进行消化去除。提取的RNA可用于RT-PCR、Nothern Blot、Dot Blot等下游实验。
（2）从细胞、组织或生物体液中快速纯化高品质RNA，硅胶膜RNeasy离心柱的结合能力达100 μg。 RNA样品最大50mg，最低只需一个细胞。（(including small RNAs 17-200 nt））
（3）从细胞、组织或酵母中快速纯化高品质RNA，硅胶膜RNeasy离心柱的结合能力达100μg 。RNA样品100个细胞-30mg，片段大于200nt
—病毒RNA提取试剂盒 （1）采用可以特异性结合病毒RNA的吸附柱和独特的缓冲液系统，适用于从血清、血浆、尿液、脑脊液等无细胞体液及细胞培养上清液中分离病毒RNA。病毒RNA特异性地结合到硅基质膜上，而污染物则流过该膜。通过两次高效洗涤完全去除蛋白质等杂质，然后用无RNase的水或试剂盒提供的RNase-Free Water洗脱高纯度的病毒RNA。由本试剂盒提取的病毒RNA可直接用于RT-PCR、Real-time RT-PCR和印迹分析等实验。
（2）产品特点：洗脱体积：6-10微升，上样量：小于200微升
（3）产品特点：洗脱体积：50微升，上样量：140微升
—全血RNA提取试剂盒 （1）适用于从新鲜全血（用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品）中提取总RNA，可以处理多至1.5 ml的全血，洗脱得到分子量大于200 bp的高纯度RNA，多个样品可以在1小时内同时完成。本产品无需CsCl纯化的超离心步骤和LiCl或乙醇沉淀，不含有苯酚或氯仿等有毒溶剂，经过纯化的RNA有效去除血红素、肝素等酶抑制剂和污染物，可直接用于各种分子生物学常规实验，如RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等实验。
（2）可从多至1ml的人类新鲜全血中纯化胞内RNA洗脱体积：最小可以6微升，产量：2-10 µg (1 ml human blood）
（3）可从多至1.5 ml的人类新鲜全血中纯化胞内RNA洗脱体积：30-100微升，产量：1–5 µg（1ml human blood）
—总RNA提取试剂盒 （1）
（2）产品特点：产物：大于17nt总RNA，上样量：单个细胞，最大可以10e6 cells or 5 mg tissue。
（3）产品特点：产物：大于200nt总RNA，上样量：5 x 10e5 cells or 5 mg tissue
—石蜡包埋组织提RNA（FFPE） （1）适用于从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中有效纯化总RNA。适合从小于30 mg的石蜡包埋组织或切片中抽提高纯度的总RNA，本试剂盒无需使用酚/氯仿抽提和异丙醇沉淀，一小时内即可完成多个样品的抽提。本品使用专门优化的裂解液和蛋白酶K，释放福尔马林固定或组织切片样本中的RNA，无需过夜操作；消化后的样品在较高的温度孵育后，去除由福尔马林交联造成的抑制作用，有效释放组织切片中的RNA，而避免危害RNA的完整性；优化的缓冲系统使裂解液中的RNA可特异结合到硅胶吸附膜上，而其他污染物可流过膜；可通过漂洗步骤有效去除，经过洗脱的RNA可直接用于RT-PCR、Real-Time PCR和印迹分析等实验。
（2）产品特点：洗脱体积：50微升，产物：大于17nt
（3）产品特点：洗脱体积：14-30微升产物：大于200nt
—植物真菌RNA提取 （1）本试剂盒用于从各种植物中提取纯化高品质总RNA，也适用于真菌菌丝RNA的提取。独特的分离柱，用于匀质化和过滤高粘度的植物或真菌裂解物，同时采用硅基质膜吸附RNA进行纯化，使多聚糖等各种污染物通过洗涤被有效去除，经洗脱的RNA可直接用于各种下游实验。由本试剂盒提取RNA分子量大于200碱基，纯度高，几乎无DNA残留。如果是对微量DNA非常敏感的RNA实验，残留的DNA可利用无RNase的DNase在柱上进行消化去除。提取的RNA可用于Northern Blot、Dot Blot 、RT-PCR和体外翻译等实验。
（2）特点：洗脱体积：25微升，产量：25微克
（3）特点：洗脱体积：30-100微升产量：25微克
—游离RNA提取 （1）游离RNA（血清血浆尿液）提取试剂特别适用于从血清、血浆中分离纯化包括microRNA和其他小RNA（<200nt）在内的总RNA。本品灵活处理不同起始量的样品，在有效裂解样本的同时，可有效保存RNA的完整性，提取的总RNA完整性好，无蛋白和DNA污染，提取的RNA可用于RT-PCR、Northern Blot和分子克隆等下游实验。
（2）每次最大可提取1ml样品，无需苯酚，最小洗脱体积6ul，需要DNA消化酶
（3）用于从人血浆或血清中分离自由循环的DNA和RNA
—RNA保护剂 （1）
（2）
二、miRNA提取系列 —microRNA提取试剂盒 （1）miRNA提取试剂盒专用于从各种动物组织、植物组织、细胞、血清、血浆等样本中分离纯化miRNA，还可以提取siRNA，snRNA等其他小于200 nt的小分子RNA，同时也可用于总RNA的提取。本品将酚/胍裂解技术和硅基质膜纯化技术相结合，独特的裂解液在有效抑制RNases的同时，可以通过有机抽提的方法除去细胞或组织样品中的大部分DNA和蛋白。对于一些敏感的下游实验中，如需富集miRNA可适用该试剂盒单独对miRNA进行富集。本品适用样本范围广，制备的RNA纯度高，可直接用于敏感的下游应用，如Northern Blot分析，Real-Time PCR，Microarray Analysis等。
（2）特点：最小洗脱体积：30微升，上样量：50mg，产物：大于17nt总RNA
（3）特点：洗脱体积：30微升，上样量：50–100 mg，产物：大于18nt
三、DNA提取系列 —DNA提取试剂盒（组织、细胞） （1）
（2）从动物血液和组织、细胞、酵母、细菌或者病毒中纯化总DNA，洗脱体积100-200微升
—DNA纯化试剂盒 （1）
（2）特点：最小洗脱体积6微升，片段大小50bp-23KB，实验时间：2分钟
（3）洗脱体积10微升，片段大小100bp-10KB
—DNA胶回收试剂盒 （1）
（2）特点：最小洗脱体积：6微升，片段：50bp-23KB，操作时间：15分钟左右
（3）特点：洗脱体积：30-50微升，片段：70bp-10KB
—基因组DNA提取试剂盒（二代测序） （1）
（2）纯化基因组DNA、细胞、组织、生物体液等DNA，纯化长达50 kb的基因组DNA，洗脱体积35微升
（3）纯化基因组DNA、线粒体DNA、细菌、寄生虫或病毒DNA，纯化长达50 kb的基因组DNA，洗脱体积50-200微升
—植物真菌DNA提取试剂盒 （1）
（2）操作时间：15分钟，产量：25微克，洗脱体积：50-100微升
（3）操作时间：一小时，产量：3-30微克，洗脱体积：500-400微升
—石蜡包埋组织提DNA（FFPE） （1）
（2）洗脱体积：30微升，上样量: up to 25 mg 组织，结合能力: 25 µg
（3）洗脱体积：20-100微升
—土壤粪便DNA提取试剂盒 （1）
（2）
注:D4300可做：水样、牛奶、土壤、粪便、生物膜、体液、口腔拭子等。 （3）
—游离DNA提取 （1）
（2）
（3）用于从人血浆或血清中分离自由循环的DNA和RNA
—DNA酶 （1）DNase I是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶，可用于降解单链或双链DNA。其原理为DNase Ⅰ水解磷酸二酯键产生带有5'-磷酸基团和3'-OH的单核苷酸或寡核苷酸。Mg2+或Mn2+都可以激活DNase I的活性，而Ca2+浓度直接影响酶的活性。Mg2+存在时可在双链DNA的每条单链上随机地产生切口；而在 Mn2+存在下可使双链DNA断裂，使DNA片段化。用于无DNA污染的RNA的制备，逆转录及体外转录等实验。
（2）
（3）
四、质粒抽提系列 —质粒小提试剂盒 （1）
（2）从1.5毫升体系分离25μg无内毒素DNA，无需沉淀细胞，操作时间8分钟内，可用于克隆、转录、转染实验、测序等
（2.1）上样量：1-5ML 产量：1-100微克转染级质粒，操作时间：15分钟 内毒素≤0.9EU/ μg
（3）可纯化至多20 μg分子生物学级纯质粒DNA，操作时间30分钟，可用于克隆、转录、转染实验、测序等
—质粒中提试剂盒 （1）
（2）特点：样本量：50ml； 时间：≤ 18min；洗脱体积：≥ 100μl；产量：≤ 300μg
—质粒大提试剂盒 （1）
（2）特点：样本量：150ml； 时间：≤ 18min，洗脱体积：≥ 200μl 产量：≤ 1.2mg
（3）纯化得到的DNA内毒素水平低于0.1 EU/µg，产量500微克
—质粒巨提试剂盒 特点：样本量：2.5L； 时间：50min；洗脱体积：≥ 2ml 产量：≤ 10mg
五、其他 （1）Proteinase K（蛋白酶K）是一种以丝氨酸为活性中心的枯草类蛋白酶，具有广泛的底物特异性，特别优先分解与疏水性氨基酸、含硫氨基酸、芳香族氨基酸的C末端邻接的酯键和肽键。可在多种不同盐、变性剂、去污剂、pH值和温度条件下起到进行分解蛋白的作用。在提取DNA和RNA的缓冲液中具有很高的活性，主要用于DNA、RNA制备过程中蛋白的消化。
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