雅酶蛋白定量试剂盒

产品内容：

Omni-Rapid™快速蛋白定量试剂盒：

      Omni-Rapid™快速蛋白定量试剂盒的原理与传统BCA蛋白定量法类似，但采用了一种不同于BCA(Bicin-choninic Acid)的全新特殊的螯合剂，从而实现了对蛋白质浓度进行快速、稳定、灵敏的测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽键能与Cu2+形成络合物，将Cu2+还原成Cu+，Cu+与螯合物结合，从而发生颜色反应。本试剂盒中的螯合剂可敏感特异地与Cu+结合，只需室温孵育5 min即可形成稳定的橙黄色水溶性复合物，而传统BCA法则需在37℃下孵育30 min才可完成颜色反应。该橙黄色的复合物在480 nm处有强光吸收值，颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒含有一系列浓度的蛋白质标准品溶液(BSA溶液)，即取即用，无需稀释，方便快捷。

产品特点：

简单快速—室温5 min完成显色反应；

方便快捷—提供即用型标准品，省去繁琐的稀释步骤；

准确性高—变异系数远小于考马斯亮蓝染色法；

线性范围宽—灵敏，检测范围：20~2000 μg/mL；

兼容性好—与大多数金属离子、螯合剂及去污剂兼容性较好。

常见问题：

1、有小伙伴问，我提取细胞样本，可不可以通过细胞计数的方法代替蛋白定量？

    至少预实验的时候建议做蛋白定量。虽然蛋白定量主要目的是对样品进行均一化处理，保证上样量一致。但是另一个作用优化上样量，也十分重要。上样量太低，目标蛋白可能检测不到；上样量太高有可能导致过曝，灰度值分析误差大。有文献报道总蛋白上样量超过10ug/孔时内参蛋白不够敏感，无法检测到差异。内参蛋白理想的上样量5ug以内，目标蛋白的上样量为10-20ug。

2、定量后，内参还是不齐？

    首先，蛋白定量环节：注意样品中是否含有干扰物质，选择适合的定量方法；检测的值是否在线性范围内；做复孔，减小误差。

    其次，转膜环节：注意转膜的均一。

最后，注意内参蛋白的选择是否合适。比如GAPDH是常用的内参蛋白，但是GAPDH是糖酵解过程中的一个酶，在缺氧，糖酵解紊乱等情况会增加GAPDH在特定细胞中的表达。内参蛋白要选表达不受实验处理影响的蛋白。

    现在也有很多人用总蛋白作为内参，即通过考马斯亮蓝或者丽春红染总蛋白，伯乐推出stain-free免染胶，也可以准确反应每个泳道中的蛋白量，可以作为WB的可靠内参。

3、样品间浓度差异大，如何调节浓度？

    样品提取时，组织样品可以通过称量，细胞样品可以通过计数，等比例加入提取液。这样各组样品浓度差异就不会非常大了。

使用ZJ102/102L引用文献：

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