Matrigel基底膜基质胶专题

   BD采用专利技术，从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中分离出BD Matrigel 基底膜基质，其主要成分由层粘连蛋白，Ⅳ型胶原，巢蛋白，硫酸肝素糖蛋白等组成，还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。BD Matrigel基底膜基质在室温条件下，聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，以及对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达的研究。

       BD Matrigel 基底膜基质形成的三维培养基质，可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时，Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达，支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。高浓度的Matrigel适用于研究体内血管生成和肿瘤细胞迁移及肿瘤模型的建立等。

◆选择指南

1. 普通MatrigelTM Matrix

(cat: : 356234，354234，356235）

普通Matrigel的蛋白浓度在9-12 mg/ml，含酚红。可用于一般细胞培养和分化，肿瘤迁移等实验。

2. GFR即低生长因子的MatrigelTM Matrix

(cat: 356230，354230，354263）

主要作用是排除生长因子对实验的干扰。适用于对基底膜制备要求较高的研究应用，比如用于管状骨细胞研究的信号优化，同时也用于原代小鼠哺乳上皮细胞的基因表达研究。

3. Phenol red-free即无酚红的MatrigelTM Matrix

(cat: :356237，354262）

和普通Matrigel的区别是不含酚红，主要用于荧光检测等光学颜色方面的研究，消除酚红指示剂的干扰。

4. High Concentration (HC)即高浓度的MatrigelTM Matrix

(cat: :354248)

蛋白浓度18-22 mg/ml。有利于肿瘤细胞迅速增长，主要用于血管生成实验，免疫小鼠注射（肿瘤模型建立）。

5. HESC-Qualified MatrigeTM Matrix

(cat:354277)

专用于人胚胎干细胞培养。

所有的基底膜，包括High Concentration HC基底膜可用于体内内皮血管生产系统的研究。也可用于人肿瘤细胞的转移和研究。相关的报道包括：前列腺癌，乳腺癌，肾上腺癌，黑素瘤，淋巴细胞白血病等。

◆产品信息

◆产品图片

储存：-20度储存

◆产品特性

       Matrigel基质会有色差变化（淡黄色到深红色），是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的，但是与5％CO2平衡后色差即会减少。冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用70％乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Matrigel呈匀浆状。

       细胞可在0.5mm厚度的Matrigel基质层表面生长，也可在1mm厚度的Matrigel三维基质内生长。过度稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层，可以用于细胞贴壁，但不能用于细胞的分化研究。

      注意：

      可将冻融后的Matrigel分装在多个小管，所有分装均需用预冷的冻存管，迅速冷冻并保存，避免多次冻融。

      Matrigel在22-35℃温度环境下快速成胶，因此溶解时在4℃冰上过夜冻融（4度时会随着温度的上升部分成胶）。所有用品在使用前需置于冰浴，必须使用预冷的移液管、吸头及小管操作Matrigel。成胶后的Matrigel可以在4℃24－48小时后重新呈液态。

◆推荐包被与成胶方法

    注意：

    为了保证Matrigel基质膜的成胶性能与稳定性，稀释浓度不应低于1：3，可用无血清培养基稀释，Matrigel成胶后立即使用。

    薄胶成胶方法：

    1. 冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。

    2. 将需要使用的培养板置于冰上，加入浓度为50μL/cm2生长面积的Matrigel基质。

    3. 在37℃放置30分钟，即可使用。

    厚胶成胶方法：

    1. 冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。

    2. 将需要使用的培养板置于冰浴，将培养的细胞与Matrigel基质混合，用移液枪头使其悬浮于基质中。加入浓度为150－200μL/cm2生长面积的Matrigel基质。

    3. 在37℃放置30分钟，可成胶。可以加入细胞培养的基质，也可使细胞直接生长在胶表面。

    薄层包被方法：

    1. 冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。

    2. 根据使用需要，采用无血清培养基稀释Matrigel基质。根据实验需要确定最佳包被浓度。

    3. 将稀释的Matrigel基质包被于所需的培养器皿中，包被量至少覆盖整个器皿的生长表面。室温下孵育1小时。

    4. 去除未结合的Matrigel，用无血清培养基轻轻地冲洗。