无血清细胞冻存和传统细胞冻存专题

　   关于细胞冻存，在-80℃或-196℃冷冻保存，是细胞长期保存的唯一方法，有利于减少污染，减少因传代次数太多而引起的遗传变异的形态改变，以及避免有限细胞系出现衰老或恶性转化。细胞冻存为培养工作带来很大的机动灵活性，降低了人力和物力的消耗。

      细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，以最大限度的保存细胞活力。在过去的几十年中，科研工作者将培养基、血清和DMSO按照一定的比例配置成冻存液，并配合手工使细胞从4℃，-20℃，-80℃到液氮中逐步转移使其达到“慢冻”的效果。但这种自制的冻存液储存时间一般比较短，不能满足时间跨度大的实验项目的需求。且这样人力和时间成本大，人手操作的误差和血清制品是批间差也给实验结果带来了不稳定性。由此商品化的无血清即用型冻存液应运而生。

一、无血清细胞冻存液相关产品：无需程序降温，-80℃长期保存

特点

省时省力——无需程序降温

使用方便——即用型细胞冻存液

安全性高——无血清成分，化学成分明确-

高品质——细胞复苏率在90%以上

长期保存——可在-80℃长期保存

二、传统细胞冻存部分产品

       一种含硫有机化合物，常温下为无色的透明液体，是一种吸湿性的可燃液体。具有高极性、高沸点、热稳定性好、非质子、与水混溶的特性，能溶于乙醇、丙醇、苯和氯仿等大多数有机物，被誉为“万能溶剂”。 过滤除菌时不能使用醋酸纤维素膜，而应该使用尼龙膜。

       二甲基亚砜是一种重要的渗透型细胞保护剂。在深低温（零下200度）保存细胞时冻存过程中，为防止细胞内液冰晶形成、渗透压改变、细胞结构紊乱等导致的损伤，有必要使用含有DMSO冷冻保护剂。DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中，降低冰点、延缓冻存过程，同时提高细胞内离子浓度，减少细胞内冰晶的形成，从而减少细胞损伤。深低温时二甲基亚砜的细胞毒性受到抑制。复苏时动作要快，尽快洗掉二甲基亚砜，否则会造成对细胞严重的毒性。二甲基亚砜（DMSO）是目前最好的细胞冻存保护剂，但也是一种以细胞毒性很大的化学试验剂。研究结果表明，培养液中DMSO浓度为10%时，细胞生长抑制率近100%；1‰浓度时抑制率为35%，即使是0.04‰的浓度，DMSO对细胞的生长也有不利的影响。