PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒（抗小鼠IgG POD）

PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒（抗小鼠IgG POD）

PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD)

培养物上清的外泌体定性·定量分析

◆特点

采用PS结合分子Tim4包被板

●　通过磷脂酰丝氨酸（PS）结合分子进行捕捉。※1

●　可检测出0.1μL培养上清液细胞外囊泡。

●　用纯化细胞外囊泡为标准品※2进行定量检测。

●　可通过WB法※3进行50～1,000倍高灵敏度检测。

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培养上清的细胞外囊泡高灵度定性·定量检测

※1比通过抗体包被板ELISA法能更好进行外囊泡的定性·定量分析。

※2请使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS获得外囊泡标准品。

※3WB法：免疫印迹实验

最优化试剂盒

●　最优化对照用一抗※4

●　最优化检测用二抗※5

●　采用显色法

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操作简便，实验重复性高

※4附加抗人CD63抗体。检测其他表面标记蛋白可利用任意小鼠单抗。

※5附加抗小鼠IgG抗体-HRP标记。

◆测定原理·产品概述

      本试剂盒含有细胞培养上清和体液样品纯化外囊泡定性分析，以及细胞上清样品外囊泡定量分析作用的酶联免疫测定试剂。将能与外囊泡表面的磷脂酰丝氨酸（PS）特异性结合的蛋白包被到板上，细胞外囊泡与其反应固定后，用任意外囊泡表面标记蛋白的小鼠单抗作为检测一抗，试剂盒的HRP标记小鼠IgG抗体为二抗，可高灵敏度检测表面具有任意标记蛋白的细胞外囊泡。另外，试剂盒含有作为控制组检测一抗的抗人CD63小鼠单抗，可检测出人CD63阳性外囊泡。

       通过MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS（Code No.: 293-77601）提纯细胞培养上清和体液样品中的外囊泡，通过本试剂盒对细胞外囊泡的表面标记蛋白进行免疫印迹实验，可50～1,000倍高灵敏度且简便进行检测。另外，从细胞上清中利用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS获得外囊泡作为标准品，可对细胞上清外囊泡进行定量分析。

◆试剂盒组成

◆案例

各种细胞培养上清纯化外囊泡定性分析

     将各种细胞获得的纯化外囊泡1ng添加至板孔中，利用能检测表面标记蛋白CD9/CD63/CD81的一抗通过本试剂盒对各表面标记量进行定性比较。

     另外，作为比较参考数据，将各细胞纯化150ng外囊泡进行电泳，利用能检测表面标记的CD9/CD63/CD81的一抗对各表面标记蛋白量进行定性分析。

正常人血清纯化细胞外囊泡的定性分析

    将从正常人血清的6个样品纯化的细胞外囊泡，通过BCA检测外囊泡膜上的蛋白浓度。分别添加40、20、10ng到孔中，用可识别表面标记CD63的对照组检测一抗测定OD值进行定性比较。

使用从体液样品纯化的细胞外囊泡具有良好的线性！！

细胞培养上清纯化细胞外囊泡的检测灵敏度参考数据

COLO201细胞培养上清纯化外囊泡，比较本试剂盒和免疫印迹实验的检测灵敏度。

免疫印迹实验和ELISA的检测灵敏度比较

      （a），（b）使用各种抗CD63抗体（其他公司产品，Wako产品：Code No. 012-27063）进行免疫印迹实验检测灵敏度数据

　　样品：COLO201细胞培养上清纯化外囊泡（MagCaptureTMExosome Isolation Kit PS纯化）

　　★：各抗体免疫印迹实验的检测限。

　　（c）Exosome ELISA Kit检测限数据

　　用本试剂盒对COLO201细胞源纯化外囊泡（使用MagCaptureTMExosome Isolation Kit PS）进行梯度稀释的样品以及缓冲液的空白值进行测定，制作COLO201标准曲线。利用此标准曲线可算出COLO201源纯化样品的最低检测灵敏度。（测定各浓度点n=6，空白点n=12）

　　比免疫印迹实验可高灵敏度检测标记蛋白。

细胞培养上清样品的稀释线性（Linearity）参考数据

COLOC201细胞培养上清纯化外囊泡为标准品制作标准曲线，以COLO201细胞培养上清5个梯度稀释样品（1:100-1:1600）进行稀释线性进行评估。

　　（MagCaptureTMExosome Isolation Kit PS纯化）　　标准品：COLO201细胞源外泌体

　　测定样品：COLO201细胞培养上清

　　一抗：试剂盒附带抗CD63抗体

　　良好的稀释线性，已确认可检测0.1μL培养上清的细胞外囊泡。

◆产品信息

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