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PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD) 二维码
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发表时间:2017-05-12 15:01作者:诺扬生物 PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD) PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD) 培养物上清的外泌体定性·定量分析 ◆特点
采用PS结合分子Tim4包被板 ● 通过磷脂酰丝氨酸(PS)结合分子进行捕捉。※1 ● 可检测出0.1μL培养上清液细胞外囊泡。 ● 用纯化细胞外囊泡为标准品※2进行定量检测。 ● 可通过WB法※3进行50~1,000倍高灵敏度检测。 ↓↓ 培养上清的细胞外囊泡高灵度定性·定量检测 ※1比通过抗体包被板ELISA法能更好进行外囊泡的定性·定量分析。 ※2请使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS获得外囊泡标准品。 ※3WB法:免疫印迹实验 最优化试剂盒 ● 最优化对照用一抗※4 ● 最优化检测用二抗※5 ● 采用显色法 ↓↓ 操作简便,实验重复性高 ※4附加抗人CD63抗体。检测其他表面标记蛋白可利用任意小鼠单抗。 ※5附加抗小鼠IgG抗体-HRP标记。 ◆测定原理·产品概述 本试剂盒含有细胞培养上清和体液样品纯化外囊泡定性分析,以及细胞上清样品外囊泡定量分析作用的酶联免疫测定试剂。将能与外囊泡表面的磷脂酰丝氨酸(PS)特异性结合的蛋白包被到板上,细胞外囊泡与其反应固定后,用任意外囊泡表面标记蛋白的小鼠单抗作为检测一抗,试剂盒的HRP标记小鼠IgG抗体为二抗,可高灵敏度检测表面具有任意标记蛋白的细胞外囊泡。另外,试剂盒含有作为控制组检测一抗的抗人CD63小鼠单抗,可检测出人CD63阳性外囊泡。 通过MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS(Code No.: 293-77601)提纯细胞培养上清和体液样品中的外囊泡,通过本试剂盒对细胞外囊泡的表面标记蛋白进行免疫印迹实验,可50~1,000倍高灵敏度且简便进行检测。另外,从细胞上清中利用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS获得外囊泡作为标准品,可对细胞上清外囊泡进行定量分析。 ◆试剂盒组成
◆案例 各种细胞培养上清纯化外囊泡定性分析 将各种细胞获得的纯化外囊泡1ng添加至板孔中,利用能检测表面标记蛋白CD9/CD63/CD81的一抗通过本试剂盒对各表面标记量进行定性比较。 另外,作为比较参考数据,将各细胞纯化150ng外囊泡进行电泳,利用能检测表面标记的CD9/CD63/CD81的一抗对各表面标记蛋白量进行定性分析。 正常人血清纯化细胞外囊泡的定性分析 将从正常人血清的6个样品纯化的细胞外囊泡,通过BCA检测外囊泡膜上的蛋白浓度。分别添加40、20、10ng到孔中,用可识别表面标记CD63的对照组检测一抗测定OD值进行定性比较。 使用从体液样品纯化的细胞外囊泡具有良好的线性!! 细胞培养上清纯化细胞外囊泡的检测灵敏度参考数据 COLO201细胞培养上清纯化外囊泡,比较本试剂盒和免疫印迹实验的检测灵敏度。 免疫印迹实验和ELISA的检测灵敏度比较 (a),(b)使用各种抗CD63抗体(其他公司产品,Wako产品:Code No. 012-27063)进行免疫印迹实验检测灵敏度数据 样品:COLO201细胞培养上清纯化外囊泡(MagCaptureTMExosome Isolation Kit PS纯化) ★:各抗体免疫印迹实验的检测限。 (c)Exosome ELISA Kit检测限数据 用本试剂盒对COLO201细胞源纯化外囊泡(使用MagCaptureTMExosome Isolation Kit PS)进行梯度稀释的样品以及缓冲液的空白值进行测定,制作COLO201标准曲线。利用此标准曲线可算出COLO201源纯化样品的最低检测灵敏度。(测定各浓度点n=6,空白点n=12) 比免疫印迹实验可高灵敏度检测标记蛋白。 细胞培养上清样品的稀释线性(Linearity)参考数据 COLOC201细胞培养上清纯化外囊泡为标准品制作标准曲线,以COLO201细胞培养上清5个梯度稀释样品(1:100-1:1600)进行稀释线性进行评估。 (MagCaptureTMExosome Isolation Kit PS纯化) 标准品:COLO201细胞源外泌体 测定样品:COLO201细胞培养上清 一抗:试剂盒附带抗CD63抗体 良好的稀释线性,已确认可检测0.1μL培养上清的细胞外囊泡。 ◆产品信息 更多应用说明,请点击: 新型亲和性外泌体纯化法与外泌体高灵敏度检测应用更多外泌体相关产品,请点击:
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