高品质BPS®淋巴细胞分离液----医用生产标准及欧盟CE双认证

1. 用无菌稀释液将血样稀释2-4倍。

注：无菌稀释液可为生理盐水，PBS缓冲溶液，HANK's缓冲溶液等，适当增加血液稀释倍数，将有利于提高单个核细胞纯度。

2. 在50ml锥底离心管中先加入15-20ml分离液（分离液启用如下图），然后缓慢加入20-30ml 经稀释的全血或组织细胞悬液至分离液液面之上。

注：适当增加分离液的使用量，将有利于提高单个核细胞纯度。

3. 室温400g离心15-30分钟，保证转子速度平稳下降。

4. 将离心管小心从离心机中取出，缓慢地吸去最上层，避免接触单个核细胞层（离心前后效果如下图。）

5. 将单个核细胞层缓慢转移到另一支50ml锥底离心管中。

6. 加入无菌洗涤液并混匀后，室温下300g离心10分钟，小心弃掉上清。

注：无菌洗涤液可为生理盐水、PBS缓冲溶液，Hank's缓冲溶液等。

7. 为了去除残余血小板，可将细胞重悬与30-50ml无菌洗涤液中，室温200g离心10-15分钟，小心弃掉上清。

8. 可选择性地重复第7步，将会去除绝大部分血小板。

9. 将细胞用缓冲液或培养液重悬后进行检测，培养等后续操作。

图1. 使用本产品对人外周血及脐带血进行分离纯化处理，所获“白膜层”界限清晰，细胞回收率高，与GE Healthcare知名产品Ficoll-Paque Premium^TM表现一致或更优，较国内同类产品优势明显，目前国内同类产品常出现的问题包括：细胞回收率低，白膜层薄（例如NA-1产品），红细胞污染（例如NA-2产品）等。

图2. 采用本产品对人外周血（n=60）及脐带血（n=30）进行分离纯化处理，单个核细胞回收率及纯度均与GE的产品相当，并显著高于国内同类产品。对于取血困难或比较珍贵的血液样本，选择具有高回收率的分离液产品对后续使用至关重要。

                          使用四正柏^®- BPS^® 产品分离人抗凝外周血单个核细胞流式分析结果

                         使用四正柏^®- BPS^® 产品分离人抗凝脐带血单个核细胞流式分析结果

图3. 使用本产品对人抗凝外周血及脐带血进行纯化处理，使用流式细胞仪对所得细胞进行分析，其外周血样本CD45+细胞比例>90%，单个核细胞纯度>80%；其脐带血样本CD45+细胞比例>85%，单个核细胞纯度>70%。