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TRIzon Pal™ 完美替代氯仿

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发表时间:2023-11-10 08:38作者:诺扬生物来源:康为世纪
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RNA提取之“TRIzol”法

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“TRIzol”作为一种RNA提取的即用型试剂,自发明至今,深受广大科研工作者的青睐。“TRIzol”主要基于异硫氰酸胍-苯酚-氯仿按特定的比例混合后,通过一次提取得到样本中的总RNA。样品首先在含有异硫氰酸胍/苯酚的溶液中进行裂解,加入氯仿后,样品会分为三层:上层为水相,下层为有机相。RNA主要存在于上层水相中,利用RNA不溶于醇类的特性,通过醇类沉淀、洗涤及再溶解可以从上清中获得纯净的RNA。

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氯仿有何用?

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氯仿在“TRIzol”法提取过程中的主要作用是促进三相分离,抽提蛋白。虽然氯仿作用巨大,但是氯仿仍然是科研工作者们心中的“痛”。


痛点1

剧毒,易挥发

氯仿:又名三氯甲烷,极易挥发,有特殊气味,在光的作用下,能被空气中的氧氧化成氯化氢和有剧毒的光气。具有一定刺激性,有麻醉性,为可疑致癌物。


痛点2

危废处理

氯仿需要在通风橱中使用,并妥善处理废液,以防止环境污染。由于氯仿极易挥发,即便在通风橱中使用,依然会残留在实验人员的衣服和皮肤上,经皮肤吸收后容易引起急性中毒。初期有头痛、头晕、恶心、呕吐、兴奋、皮肤湿热和粘膜刺激等症状。


痛点3

易制毒,难购买

氯仿属于第二类易制毒化学品,根据《危险化学品安全管理条例》、《易制毒化学品管理条例》,其购买和使用受公安部门管制,购买流程复杂。



TRIzon Pal™ 完美替代氯仿

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TRIzon Pal™可与“TRIzol” 以及TRIzon Reagent (CW0580)配合使用,对裂解体系进行反复抽提以去除蛋白质,可完美代替氯仿用于RNA抽提,解决氯仿难购买、毒性大、易挥发难储存等问题。TRIzon Pal™为非危险化学品,沸点高不易挥发,是一种安全的有机溶剂。



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TRIzon Pal™性能

实验设计1:分别使用氯仿与TRIzon PalTM搭配TRIzon Reagent总RNA提取试剂(CW0580S)针对植物、动物组织、细胞进行RNA提取,提取结果如下:

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实验设计2:分别使用由氯仿与TRIzon Pal™搭配TRIzon Reagent总RNA提取试剂(CW0580S)提取出的293T细胞RNA作为模板,用SYBR Green进行实时荧光定量检测(引物为RNA内参引物TFRC),定量结果如下:

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实验结果表明:TRIzon Pal™ 可完美替代氯仿用于搭配“TRIzol”或者TRIzon Reagent总RNA提取试剂(CW0580S)进行总RNA提取。


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