商城导航
  • 分子生物学
    核酸纯化
    基因组DNA提取
    质粒提取
    核酸采集与保护
    DNA产物纯化及凝胶回收
    RNA提取
    磁珠法核酸提取
    核酸纯化其他
    PCR相关
    荧光定量PCR
    一般PCR产品
    RT/PCR
    PCR其他产品
    分子标准品
    核酸电泳及其他
    DNA MARKER
    核酸其他及电泳
    RNA MARKER
    特殊标记MARKER
    克隆
    感受态细胞
    连接酶
    克隆其他
    限制性内切酶
    菌株
    质粒载体
    分子相关
    点突变及基因突变检测
    二代测序产品
    分子杂交
    分子其他
    甲基化
    PCR Array
    肿瘤与疾病 PCR Array
    信号通路 PCR Array
    试剂盒 PCR Array
    生物过程 PCR Array
    免疫 PCR Array
    分子功能 PCR Array
    miRNA PCR Array
    lncRNA PCR Array
    circRNA PCR Array
    ARG PCR Array
  • 抗体
    常用一抗
    内参抗体
    标签抗体
    二抗相关
    标记二抗
    二抗
    一抗
    综合一抗
    流式抗体
    神经相关抗体
    抗体相关
    抗体标记
    流式相关试剂
    抗体同型对照
    抗体其他
  • 免疫蛋白研究
    蛋白检测
    Western Blot
    蛋白提取
    蛋白纯化
    蛋白定量
    蛋白Marker
    蛋白电泳
    免疫组化
    ELISA
    ELISA辅助
    蛋白芯片
    四聚体
    蛋白相关
    蛋白其他
    蛋白质与多肽
    蛋白/细胞因子
    免疫沉淀
    RNA/RNP互作
    IVD相关
    IVD原料
    免疫蛋白其他
    免疫蛋白其他试剂盒
  • 细胞生物学
    细胞分析
    细胞凋亡
    细胞增殖
    细胞培养与转染
    基础培养基
    细胞冻存
    细胞污染去除与预防
    3D培养
    细胞培养其他
    细胞转染
    细胞分离
    无血清细胞培养基
    NK,CIK,CAR-T产品
    干细胞产品
    抗体生产培养基
    无血清培养基配套产品
    细胞株
    细胞培养微载体
    牛血清
    其他血清
    外泌体
    外泌体提取纯化
  • 生化试剂
    染料/染色剂
    荧光染料
    染色剂
    生化相关
    生命科学
    生化试剂盒
    其他生化试剂
    纯化相关
    层析填料树脂
    培养基
    酵母缺陷型培养基
    发酵
    微生物检测
    微生物培养基
    标品
    分析对照品/标准品
    其他生化
    磁珠
    通用缓冲液
    内毒素检测鲎试剂
  • 耗材
    PCR相关
    PCR耗材
    耗材其他相关
    通用耗材
    膜/过滤
    转印膜
    滤器
    膜其他
    滤膜
    滤纸
    细胞相关
    细胞培养耗材
    TRANSWELL
    流式耗材
    蛋白研究相关
    WB相关耗材
    免疫组化耗材
    激光共聚焦耗材
    动物手术器械
    手术器械包
    剪刀
    蛙类手术器械
    手术刀∣刀柄∣刀片
    镊子
    骨剪∣骨钳
    伤口缝合∣止血
    消毒∣灭菌∣防护
    拉钩∣撑开器
    刮匙∣刮铲∣探针
    动物标记
    固定∣备皮∣钻孔
    呼吸麻醉
    注射和给药
    心脑血管研究
    钳子
    取样∣接种∣制标
  • 仪器
    电泳设备
    蛋白电泳整机
    垂直蛋白电泳配件
    蛋白转印配件
    电泳其它配件
    电泳仪电源
    水平电泳配件
    水平电泳整机
    恒温震荡金属浴
    摇床
    印迹系统
    摇床配件
    金属浴配件
    转印装置
    多用道组织研磨仪
    核酸分析
    PCR仪
    核酸提取仪相关
    分液相关
    移液器
ABUIABAEGAAg2cem8wUo9P7qsgQwsAk40gs

0571-86893171

工作日8:30-17:30

WAKO-ADRA试剂盒 无动物参与的皮肤致敏试验方法

 二维码 56
发表时间:2022-10-12 15:31作者:诺扬生物来源:WAKO

无动物参与的皮肤致敏试验方法171560750175.jpg

ADRA试剂盒



  ADRAAmino acid Derivative Reactivity Assay,氨基酸衍生物反应法)是应用了N-(2-(1-naphthyl) acetyl)-L-cysteine【NAC】和α-N-(2-(1-naphthyl) acetyl)-L-lysine【NAL】的化学品皮肤致敏试验方法,该方法无动物参与,是动物皮肤致敏试验的替代方法,符合OECD TG442C(经济合作与发展组织化学品 TG442C测试准则)



◆原理


皮肤致敏是由致敏物质与蛋白结合形成复合物(KE1)开始的,该复合物通过致敏物质与蛋白中的半胱氨酸的巯基或赖氨酸的氨基的共价结合所得。ADRA试验利用NAC(半胱氨酸衍生物)和NAL(赖氨酸衍生物)替代蛋白,通过NAC、NAL和待测物质的反应来预测待测物质与蛋白的结合性。

ADRA试验通过将NAC、NAL溶液与待测物溶液混合,在25°C下反应24小时,然后用HPLC法对反应溶液中残留的NAC和NAL的浓度进行定量,从而对待测物质皮肤致敏性进行评估。


171560749920.png



◆优点


 灵敏度高:在相对长的波长下(281 nm)检测,可防止待测样品和亲核试剂的共洗脱。

 沉淀少:ADRA试验所需反应物的浓度仅为DPRA法的1%,可避免沉淀的产生。

 重复性好:在HPLC分析前,通过添加终止液(2.5%TFA)来终止反应,因此检测的可重复性好。

 高通量:ADRA试验使用96孔板和多通道移液器,可在短时间内测定多个样品。



◆试剂盒组成



试剂名称

容量

包装

NAC

10 mL用

2瓶

NAL

10 mL用

2瓶

NAC 缓冲液 (pH 8.0) (预混合)

300 mL用

2瓶

NAL 缓冲液 (pH 10.2) (预混合)

300 mL用

2瓶

0.01 mol/L EDTA溶液

1 mL

2瓶



01294_img02.jpg



◆使用方法


  用水将预混合缓冲液溶解,再将NAC和NAL溶于其中,然后在96孔板与待测物反应24小时后,通过HPLC即可进行分析。

  预混缓冲液、NAC和NAL都已经按照反应所需的量分装好,只需进行溶解即可用于ADRA试验。



◆视频

操作视频

●   缓冲液的制备

●   Day1 反应溶液的制备

●   Day2 反应的终止


介绍视频

●   ADRA试剂盒介绍宣传视频



◆其他需要用到的试剂·实验器材


试剂


产品编号

产品名称

规格

包装

204-02743

Trifluoroacetic Acid
三氟乙酸

和光特级

25 mL

015-08633

Acetonitrile
乙腈

高效液相色谱仪用

3 L

217-01031

Ultrapure Water
超纯水*

超微量分析用

1 L

016-00346

Acetone
丙酮* *

试剂特级

500 mL

043-07216

Dimethyl Sulfoxide
二甲基亚砜

试剂特级

500 mL

* 蒸馏水或更高级别的水(ADRA试验需要使用金属含量低的水。)

* * 请勿在被测物质溶于水或乙腈时使用。

※ 需要用苯乙醛 (CAS RN® 122-78-1)作为阳性对照化合物。


实验器材


● 电子天平:精确到0.1 mg

● 微量移液枪:量程为2~10 µL、10~100 µL和100~1000 µL的3种移液枪

● 12道移液器:量程为50~150 µL

● HPLC系统:配套96孔用遮光自动进样器,以0.3 mL/min流速进样

● UV检测器:二极管阵列检测器(PDA检测器)或吸光度检测器(281 nm)

● HPLC柱:Wakopak® Core C18 ADRA Φ3.0 × 150 mm(粒径:3.6 μm)(产品编号:233-63991或同类型产品

● pH计:pH可读取到±0.01,并配套校准用缓冲液

● 恒温箱温度可设定为25℃

● 96孔板

● 500 mL PE瓶

● 试管混合器

● 微孔板封板膜:岛津GLC封板膜(产品编号:568-RES001)或同类型具有高密封性和耐溶剂性的产品

● 微孔板振荡器

● 微孔板离心机

ADRA中用到的所有容器或器具(HPLC组件除外),要求使用PP或PE制的一次性用品。金属离子的混入会使NAC二聚化从而导致无法正确进行评估。



◆产品列表


产品编号

产品名称

规格

包装

296-80901

ADRA Kit
ADRA试剂盒

for Skin Sensitisation Test
皮肤致敏检测用

1 kit



◆相关产品


ADRA专用色谱柱



◆相关应用


皮肤致敏试验替代法ADRA应用实例:使用Wakopak® Core C18 ADRA色谱柱对"ADRA"中常见化合物进行分析


※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。



—————————————————————————————————
0571-86893171

order@ny-bio.com
浙江省杭州市江干区新塘路672号中豪五星国际商业中心
在线客服
 
 
 工作时间
周一至周五 :8:30-17:30
 联系方式
微信:nuoyang004
 
 
 
 
会员登录
登录
其他账号登录:
我的资料
我的收藏
购物车
0
留言