二代测序-ZYMO甲基化建库试剂盒

技术介绍

     高通量测序技术（High-throughput Sequencing）是一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定，又称下一代测序技术（Next-Generation Sequencing，NGS）、二代测序技术，其使得可对一个物种的基因组和转录组进行深入、细致、全貌的分析，所以又被称为深度测序（Deep Sequencing）。
       第二代测序技术的核心思想是边合成边测序（Sequencing By Synthesis），即通过捕捉新合成的末端的标记来确定DNA的序列，现在广泛应用的二代测序仪供应商主要为Illumina和ion torrent（Thermo Scientific），在国内还有 华大智造（MGI）测序平台

意义

        高通量测序技术的诞生可以说是基因组学研究领域一个具有里程碑意义的事件。该技术使得核酸测序的单碱基成本与第一代测序技术相比急剧下降，低成本的单碱基测序成本使得我们可以实施更多物种的基因组计划从而解密更多生物物种的基因组遗传密码。同时在已完成基因组序列测定的物种中, 对该物种的其他品种进行大规模地全基因组重测序也成为了可能。在临床方面，对疾病诊断、用药和遗传病检测具有很强的潜力。

     ZYMO RESEARCH生物公司位于美国加州Orange County，创建于上世纪90年代初，主要研发和生产表观遗传学系列产品和常用分子生物学试剂盒，其DNA甲基化，羟甲基化，核酸提取等产品已得到世界各顶级实验室的认可，产品以“快速、简便、超纯”的特点在众多生物公司中脱颖而出，独占鳌头。产品已经形成了覆盖美、英、德、法、日、韩等50多个国家的销售网络，并且销售额快速增长。使用其产品的论文已经在各种权威性科技期刊 （如NATURE 自然、SCINECE 科学、PNAS 美国科学院院刊、Stem Cells 干细胞、Nucleic Acids Res核酸研究等）上发表。

zymo文库构建产品

实验流程图：

产品介绍

1.微量甲基化建库试剂盒 Pico Methyl-Seq™ Library Prep Kit（ D5456）

      用途：
      适用于Illumina测序平台的全基因组甲基化建库试剂盒
      特点
      •重亚硫酸盐转化后进行建库；
      •DNA起始量10pg-100ng；
      •无需接头连接及凝胶纯化；
      •适用于FFPE、 ChIP及ssDNA样本；
      •包含全部试剂：转化试剂、酶、 Index、纯化柱都包含，无需额外购买试剂；

2、RRHP 5-hmC Library Prep Kit羟甲基化建库试剂盒

         用途：
       适用于Illumina测序平台的全基因组羟甲基化建库试剂盒   

        特点：
        •DNA5'羟甲基化检测；
       •DNA起始量神经元细胞100ng,非神经元细胞500ng；
       •无需重亚硫酸盐转化及氧化处理；
       •包含羟甲基化建库全部试剂：转化试剂、酶、Index、纯化柱都包 含，无需额外购买试剂。

       羟甲基化建库流程

                                                                                                                                             提取DNA
                                                                                                                                                    ↓
                                                                                                         MSPI内切酶（识别甲基化位点）以区别甲基化和非甲基化
                                                                                                                                             　   ↓
                                                                                                                                    包含羟甲基化，甲基化
                                                                                                                                             　   ↓
                                                                                                                                              加接头
                                                                                                                                         ↙            ↘
                                                                                                                                      羟甲基化    甲基化
                                                                                                                                             ↘      ↙
                                                                                                                    糖基化修饰（只有羟甲基化位点能糖基化）
                                                                                                                                          ↙               ↘
                                                                                                          （ 无糖基化）MSPI切除     MSPI不能切除（有糖基化）
                                                                                                                                          ↘              ↙
                                                                                                              （羟甲基化片段含接头、甲基化片段接头被切除）
                                                                                                                                             　    ↓
                                                                                                                               羟甲基化片段PCR上机测序

4.其他产品列表