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免疫细胞无血清培养基(CIK细胞)

简要描述:
友康生物免疫细胞无血清培养基(CIK),用于单核细胞向CIK细胞的体外诱导及体外大规模扩增培养。


  • 产品货号 产地 编码 规格 价格 优惠价 货期 数量 备注
  • NC0101 友康 Y9412  1000ml/瓶 ¥560 ¥560 不限
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产品描述

免疫细胞无血清培养基(CIK)

【免疫细胞无血清培养基(CIK)   用途与描述 】

免疫细胞无血清培养基,可培养新鲜采集的外周血样本,也可培养浓缩白细胞样本以及冻存的单个核细胞。
可用于脐带血样本的培养。

【免疫细胞无血清培养基(CIK)  使用方法】

1、采集与分离外周血
采集外周血,Ficoll密度梯度离心分离收集单个核细胞。

2、单个核细胞的接种与诱导活化
1) 0d时,绷胞计数。按细胞密度2x106cell/mL接种至对应体积的培养液中。
    添加诱导因子YC001一支。添加10%比例的自体血浆。
2) ld时(24小时),添加诱导因子YC002、YC003、YC004至已经接种细胞的培养液中。
    将YC005添加至未经使用的培养基中,待用。

3、细胞的连续培养与扩增
1) 3d时,补入新鲜培养液,调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同时添加新加入培养液体积l0%比例的
自体血浆。补液比例大致在1:2左右(原有培养液体积:新加培养液体积)
2) 5d时,补入新鲜培养液,调整细胞密度至【0.6-0.8)x106cell/mL。补液比例大致在1:3左右。
3) 7d时,补入新鲜培养液,调整细胞密度至(06-08)x106cell/mL。补液比例大致在1:2左右。
4) 9d时,将剩余培养液全部加入。

4、收获细胞
培养周期结束后,依据细胞量收获细胞。

【供参考的补液程序范围】

2L培养体系补液体积示意表:50mL外周血,接种密度2.0x106 cell/mL。

天数

操作方式

原有培养液
体积/mL

新加培养液
体积/mL

培养液
总体积/mL

血浆添加
/mL

因子添加

备注

0d

接种

0

25

25

2.5

YC001

T75瓶

1d

诱导





YC002
YC003/YC004


3d

补液

25

50

75

5


换瓶
T175瓶

5d

补液

75

225

300



转培养袋,
平分两袋

7d

补液

300

700

1000



每袋补350mL

9d

补液

1000

1000

2000



每袋补500mL

备注:
1)补液后最优密度区间为(0.6-0.8)x106cell/mL。若按体积补液与最优密度区间有冲突的话,请以最优密度区间为准。
2)纯粹按固定体积接种与补液并非不可,但应建立在丰富的样本量基础之上。
3)外周血量少于50mL,应使用的补液程序,请联系本公司免费索取。 

【免疫细胞无血清培养基(CIK)   产品性能之外周血样本

1. 细胞总数:125亿,折合62.5亿/L。

免疫细胞无血清培养基培养的细胞的数量增长曲线.jpg

2、CD3+CD56+阳性率在25%-55%

免疫细胞无血清培养基培养的细胞的流式检测数据.jpg

3. 细胞支持密度更高。
培养14天后,细胞密度可至5.7×106cell/mL。 培养15天后,细胞密度可至6.2×106cell/mL。

免疫细胞无血清培养基培养的细胞的密度.jpg

4. 培养后期补液结束后,细胞维持能力更强。
最后一次补液(9d),持续至17天,细胞数量一直维持增长,未见明显下降。

免疫细胞无血清培养基培养的细胞的维持能力.jpg

【免疫细胞无血清培养基(CIK)   产品性能之脐带血样本

50mL脐带血

免疫细胞无血清培养基补液程序-脐带血.jpg

细胞生长曲线

CIK细胞生长曲线—脐带血.jpg

CIK细胞阳性率

CIK CD3.jpg     CIK  CD56.jpg     CIK  CD3+CD56+.jpg



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