二代测序（NGS）优选产品集

技术介绍

      高通量测序技术（High-throughput Sequencing）是一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定，又称下一代测序技术（Next-Generation Sequencing，NGS）、二代测序技术，其使得可对一个物种的基因组和转录组进行深入、细致、全貌的分析，所以又被称为深度测序（Deep Sequencing）。
       第二代测序技术的核心思想是边合成边测序（Sequencing By Synthesis），即通过捕捉新合成的末端的标记来确定DNA的序列，现在广泛应用的二代测序仪供应商主要为Illumina和ion torrent（Thermo Scientific），在国内还有 华大智造（MGI）测序平台

意义

       高通量测序技术的诞生可以说是基因组学研究领域一个具有里程碑意义的事件。该技术使得核酸测序的单碱基成本与第一代测序技术相比急剧下降，低成本的单碱基测序成本使得我们可以实施更多物种的基因组计划从而解密更多生物物种的基因组遗传密码。同时在已完成基因组序列测定的物种中, 对该物种的其他品种进行大规模地全基因组重测序也成为了可能。在临床方面，对疾病诊断、用药和遗传病检测具有很强的潜力。

测序平台仪器示例

Illumina（Illumina公司的各型号测序仪）

美国Illumina公司自2006年进军基因测序市场以来，陆续发布了HiSeq、MiSeq、NextSeq等一系列测序仪器。

ion torrent （Thermo Scientific）

华大智造（MGI）测序平台

诺扬优选产品介绍：

产品总览

一、beckman磁珠
二、zymo文库构建产品
三、康为文库构建产品

实验流程图：

一、beckman磁珠—Agencourt PN系列明星产品介绍产品

      主要应用：PCR、qPCR、NGS、芯片

1、Ampure XP核酸纯化试剂盒

      产品描述：

      Agencourt AMPure XP是一种能够获得高质量DNA产物的核酸纯化试剂盒；纯化后的核酸纯度高，无盐离子残留，无需离心或过滤；既可以手工操作，也可以使用自动化工作平台以96孔或384孔板的形式完成。

   下游应用

      •NGS
      •PCR
      •基因分型

      特点：

      •ddDNA及ssDNA回收率
      •有效去除dNTPs、引物、盐离子及其他杂质
      •纯化产物4°C放置7天无降解
      •适用于自动化平台

二、zymo文库构建产品

1.微量甲基化建库试剂盒 Pico Methyl-Seq™ Library Prep Kit（ D5456）

      用途：
      适用于Illumina测序平台的全基因组甲基化建库试剂盒
      特点
      •重亚硫酸盐转化后进行建库；
      •DNA起始量10pg-100ng；
      •无需接头连接及凝胶纯化；
      •适用于FFPE、 ChIP及ssDNA样本；
      •包含全部试剂：转化试剂、酶、 Index、纯化柱都包含，无需额外购买试剂；

2、RRHP 5-hmC Library Prep Kit羟甲基化建库试剂盒

         用途：
       适用于Illumina测序平台的全基因组羟甲基化建库试剂盒   

        特点：
        •DNA5'羟甲基化检测；
       •DNA起始量神经元细胞100ng,非神经元细胞500ng；
       •无需重亚硫酸盐转化及氧化处理；
       •包含羟甲基化建库全部试剂：转化试剂、酶、Index、纯化柱都包 含，无需额外购买试剂。

       羟甲基化建库流程

                                                                                                                                             提取DNA
                                                                                                                                                    ↓
                                                                                                         MSPI内切酶（识别甲基化位点）以区别甲基化和非甲基化
                                                                                                                                             　   ↓
                                                                                                                                    包含羟甲基化，甲基化
                                                                                                                                             　   ↓
                                                                                                                                              加接头
                                                                                                                                         ↙            ↘
                                                                                                                                      羟甲基化    甲基化
                                                                                                                                             ↘      ↙
                                                                                                                    糖基化修饰（只有羟甲基化位点能糖基化）
                                                                                                                                          ↙               ↘
                                                                                                          （ 无糖基化）MSPI切除     MSPI不能切除（有糖基化）
                                                                                                                                          ↘              ↙
                                                                                                              （羟甲基化片段含接头、甲基化片段接头被切除）
                                                                                                                                             　    ↓
                                                                                                                               羟甲基化片段PCR上机测序

三、康为建库试剂盒