Thermo Scientific 克隆试剂盒

分子克隆是分子生物学工作流程的关键组成部分，其可用于组装重组 DNA 分子并指导其复制。在分子克隆工作流程中，待克隆的 DNA 经过鉴定，并用酶对其进行处理以产生 DNA 片段。然后将这些片段与载体 DNA 组合以产生重组 DNA 分子。

一、CloneJET PCR Cloning Kit——适用于各种类型DNA片段的通用克隆试剂盒：灵活、创新、快速

产品简介

Thermo Scientific CloneJET PCR 克隆试剂盒是一款多功能的阳性克隆筛选系统，可高效克隆任何 PCR 产物。只需五分钟即可连接至阳性筛选载体，并获得超过99%的重组克隆。实验室常用的 E.coli菌株都可用该连接产物直接进行转化。

产品特点

• 快捷——可在短短5分钟内克隆 PCR 产物

• 多功能性——适用于磷酸化或非磷酸化 的DNA 片段，以及平末端和粘性末端 PCR 产物

• 高效——可获得超过99%的阳性重组克隆，且无克隆背景

• 经济——无需昂贵的蓝白斑筛选

• 兼容性强——可直接转化进常用 E. coli 菌株，包括 TOP10 和 XL1-Blue

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阳性克隆筛选原理

pJET1.2/blunt 载体携带一个致死性限制性酶基因，此基因在 DNA 片段插入克隆位点后即被破坏。因此，只有含重组质粒的细菌细胞才能生长形成菌落。如果 pJET1.2/blunt 载体在没有片段插入的情况下重新环化，会表达致死性限制性酶，其在转化后杀死宿主 E. coli 细胞。这种阳性筛选大大加快了菌落筛选的进程，节省了蓝白斑筛选所需的额外成本。

为了便于对插入片段进行鉴定和后续处理，pJET 1.2/blunt 载体的多克隆位点包含两个 BgIII 识别序列，横跨插入位点两端。此外，载体含有用于 in vitro   和 in vivo转录以及插入片段测序的 T7 启动子。

二、不依赖连接酶的克隆试剂盒

产品简介

Thermo Scientifific™ aLICator™ 不依赖连接酶克隆和表达系统可实现快速高效的克隆，无需连接，且可随后在大肠杆菌中进行严格的基因调控表达。其中的pLATE细菌表达载体适用于目的蛋白的高水平表达，基础 (非诱导) 表达水平极低。

产品特点

• 无需采用传统方法酶切和连接DNA

• 严格调控蛋白质生成

• 一步法去除His-标签

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三、用于DNA连接和末端修复的试剂盒

产品简介

Thermo Scientifific™ 快速DNA连接试剂盒可实现粘性末端或平末端DNA的快速连接，室温下只需5分钟。快速连接效率相当于T4 DNA连接酶标准1小时连接的效率。反应混合物可直接用于细菌转化。

Thermo Scientifific™ 快速DNA末端修复试剂盒可用于DNA末端的平端化和磷酸化，只需5分钟。

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